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eese Witherspoon est né le 22 mars 1976 à la Nouvelle-Orléans. Son aïeul, John Witherspoon, a signé la Déclaration d'indépendance.
Elle a 14 ans, en 1990, lorsqu'elle décroche son premier grand rôle au cinéma pour "Un été en Louisiane" dans lequel elle incarne un garçon manqué.
En 1994, elle choisit d'étudier la littérature anglaise à l'université de Stanford, mais revient bien vite sous les feux de la rampe.
Elle épouse Ryan Philippe en 1999, son partenaire à l'écran dans "Sexe intentions". Ils auront deux enfants, Ava Elizabeht (1999) et Deacon Reese (2003), avant de se séparer en 2006. Elle est aujourd'hui en couple avec l'acteur Jack Gyllenhaal.
En 2009, elle a donné sa voix à l'un des personnages du nouveau film d'animation des studios Dreamworks, "Monsters contre Aliens".
En 2001, son rôle comique dans "La revance d'une blonde" la propulse au rang de superstar. En 2006, elle reçoit l'Oscar de la meilleure actrice pour son rôle dans "Walk the Line".